U biološkim istraživanjima obično se koriste polipeptidi s dugom sekvencom.Za peptide s više od 60 aminokiselina u sekvenci, ekspresija gena i SDS-PAGE općenito se koriste za njihovo dobivanje.Međutim, ova metoda traje dugo i konačni učinak odvajanja proizvoda nije dobar.
Izazovi i rješenja za dugu sintezu peptida
Kod sinteze dugih peptida uvijek se susrećemo s problemom, a to je da se sterička smetnja reakcije kondenzacije povećava s porastom sekvence u sintezi, te je potrebno prilagoditi vrijeme reakcije kako bi reakcija bila potpuna.Međutim, što je vrijeme reakcije dulje, to se stvara više nuspojava i stvara se dio ciljnog peptida.Takvi ostaci – manjkavi peptidni lanci ključne su nečistoće koje nastaju u dugoj sintezi peptida.Stoga, u sintezi dugog peptida, ključni problem koji moramo prevladati jest istražiti visokokvalitetne reakcijske uvjete i reakcijske metode, kako bi reakcija kondenzacije aminokiselina bila sveobuhvatnija i potpunija.Osim toga, smanjite vrijeme reakcije, jer što je duže vrijeme reakcije, to je više nekontroliranih nuspojava, to su nusproizvodi složeniji.Stoga su sažete sljedeće tri točke:
Mikrovalna sinteza može se koristiti: Za neke aminokiseline koje se susreću u procesu sinteze, a koje nije lako integrirati, može se koristiti mikrovalna sinteza.Ova metoda ima izvanredne rezultate, te uvelike skraćuje vrijeme reakcije i smanjuje stvaranje dva ključna nusprodukta.
Može se koristiti metoda sinteze fragmenata: Kada je neke peptide teško sintetizirati uobičajenim metodama sinteze i nije ih lako pročistiti, možemo usvojiti cijelu kondenzaciju nekoliko aminokiselina u određenom segmentu peptida na peptidni lanac kao cjelinu.Ova metoda također može riješiti mnoge probleme u sintezi.
Može se koristiti sinteza acilhidrazida: sinteza peptida acilhidrazidom je metoda sinteze krute faze N-terminalnog Cys peptida i C-terminalnog polipeptidnog hidrazida kemijska selektivna reakcija između stvaranja amidnih veza kako bi se postigla metoda vezivanja peptida.Na temelju položaja Cys u peptidnom lancu, ova metoda dijeli cijeli peptidni lanac u više sekvenci i sintetizira ih pojedinačno.Konačno, ciljni peptid se dobiva reakcijom kondenzacije tekuće faze.Ova metoda ne samo da uvelike smanjuje vrijeme sinteze dugog peptida, već i značajno povećava čistoću konačnog proizvoda.
Dugo pročišćavanje peptida
Posebnost dugih peptida neizbježno dovodi do složenih komponenti sirovih peptida.Stoga je također izazov pročistiti duge peptide HPLC-om.amiloid serije procesa pročišćavanja polipeptida, apsorbira puno iskustva i uspješno se koristi u pročišćavanju dugog peptida.Usvajanjem nove opreme, miješanjem višestrukih sustava za pročišćavanje, ponovljenim odvajanjem i drugim iskustvenim metodama, stopa uspješnosti dugotrajnog pročišćavanja peptida znatno je poboljšana.
Vrijeme objave: 18. travnja 2023